АГЕНТСТВО США ПО ОХРАНЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

ВАШИНГТОН, ОКРУГ КОЛУМБИЯ, 20460

10 ИЮНЯ 1982 ГОДА                       

ПОЛУЧЕНО 14 ИЮНЯ 1982 ГОДА

Уважаемый господин Граббс:

Настоящим уведомляем вас, что направленные Вами технические данные по продукту для типа L, BBC Plus, были приняты Агентством по охране окружающей среды. Представленные данные по продукту были рассмотрены и признаны соответствующими требованиям к биологически активным добавкам, содержащимся в п. 2005 Приложения Х к Национальному плану срочных действий при загрязнении нефтью и опасными веществами. В соответствии с Приложением Х, технические данные по продукту будут храниться в файле, а Координатор на местах может санкционировать использование биологически активных добавок на воде и в береговой зоне только после получения одобрения по соответствующим каналам, указанным в Плане. Принятие технических данных о продукте не является одобрением биологически активной добавки или не подразумевает соблюдение любых критериев минимальных стандартов для таких веществ.

Как указано в пункте 2005.1, «Разрешение на использование биологически активных добавок», указанные биологически активные вещества могут использоваться только после (1) принятия технических данных по продукту, (2) направления информации о химическом составе и соотношении действующих веществ или дополнительных питательных веществ Координатору на местах, и (3) направления одобрения, выданного представителем Агентства по охране окружающей среды Группе регионального реагирования.

Во избежание любых возможных неправильных истолкований и неправильных заявлений, данное письмо-согласие может воспроизводиться только во всей своей полноте в любой рекламной или технической литературе по биологически активным добавкам. Несоблюдение ограничений, содержащихся в Приложении Х, ли ненадлежащая ссылка на Агентство по охране окружающей среды в попытке продемонстрировать одобрение биологически активной добавки будет служить основанием для отзыва данного письма-согласия. Любые изменения, вносимые в состав биологически активной добавки, влияющие на данные, направленные в соответствии с п. 2005, 3-4, приведут к необходимости повторного тестирования такой добавки, прежде чем будет повторно выдано согласие.

С уважением,

(подписано)

Х.Д. Ван Клив

И.о. директора

Отдел по реагированию в чрезвычайных ситуациях (WH-548-G)

Сертификат о микробной активности

Микробный тест был выполнен независимой коммерческой аналитической лабораторией («Индастриэл Лэборатриз, Инк.») по продукту «Эй-Си-Ти Клинерз», выпускаемому «Франссен Энтерпрайзис», под руководством «Форенсик Эппликейшнз Консалтинг Текнолоджиз, Инк.», для обеспечения безошибочности результата анализа. «Франссен Энтерпрайзис» не участвовала в организации или выполнении тестирования.

Для проведения теста лаборатория смешала 150 граммов образцового продукта с 350 граммами предварительно подготовленной «загрязненной» тестовой почвы и 100 мл деионизированной воды. Препарат тщательно перемешали и выдержали в течение 15 дней. Тест был «двойным слепы тестом», то есть ни лаборатория, ни «Франссен Энтерпрайзис» не знали, какие именно образцы были направлены в лабораторию.

В отношении статически действительной выборки смеси было проведено определение количества бактерий посевом. Результаты указывали (в высокой степенью вероятности) на присутствие в смеси жизнеспособных бактерий. Смесь содержала приблизительно 800 КОЕ на один грамм смеси. Анализ показал, что фактическая концентрация имела ожидаемое логарифмически нормальное распределение жизнеспособных единиц, причем в некоторых образцах количество КОЕ было равно 1800 на грамм смеси.

Введение

«Эй-Си-Ти Терра Фирма Клинер» - это специальная собственная формула, основанная на широко известном процессе удаления плавающих загрязнений, в ходе которого используются живые организмы, «поедающие» нефтяные углеводороды (НУВ). Поскольку в ходе этого процесса удаления плавающих загрязнений используются живые организмы, он называется «биологическим удалением плавающих загрязнений». Когда живые организмы «поедают» НУВ, они превращают НУВ в более мелкие соединения, которые самостоятельно разлагаются дальше, или которые улетучиваются в атмосферу, или превращаются в неорганические материалы.

Исследования показали, что при идеальных аэробных условиях до 80% от не летучих компонентов, находящихся в нефтяной смеси, окисляются Бактериями в течение 6-12 месяцев с момента начала применения. (Брок, 1994 год).

В связи с тем, что для роста конкретных живых организмов необходимо удовлетворение их конкретных потребностей, которые должны удовлетворяться человеком, отсутствует опасность заражения партии нефти на НПЗ колонией этих живых организмов, поскольку в трубах, резервуарах, на складах, в глинистых породах или процессах, используемых на НПЗ, отсутствуют условия, необходимые для роста бактерий и расщепления углеводородов.

История

Биологическое удаление плавающих загрязнений в качестве приемлемого метода использовалось в США с 1960-х годов. Поскольку эта область микробиологии начала процветать в начале нынешнего века, ученые начали осознавать, что нормальные биологические процессы обыкновенных, широко распространенных микробов можно использовать такими способами, которые невозможно было даже представить себе в прошлом.

Например, в начале ХХ века обычные бактерии использовались для производства лекарств, инсулина, антибиотиков и множества других продуктов, приносящих пользу человеку. В 1960-е годы общественное сознание повернулось от необузданной индустриализации к экологичному промышленному росту.

Это новое сознание повысило значимость борьбы с загрязнением окружающей среды и потребовало от отрасли нахождения новых способов недопущения загрязнения окружающей среды и исправления ситуации в зонах, в которых произошло такое загрязнение.

Начался новый век – век микробов.

Когда микробиологи начали использовать микробы в необычных ситуациях, микроорганизмы были не новыми – просто улучшилось понимание нами существующих организмов, и появились новые способы применения их природных характеристик на пользу человеку.

Естественные средства удаления загрязнения

Здоровая почва богата бактериями. Каждый грамм нормальной повседневно используемой почвы может содержать от 10 млн. до 1 млрд. колониеобразующих единиц (КОЕ) гетеротрофных бактерий на один грамм почвы (Бесс, 1999 год). Один грамм грязи может содержать более 10 000 различных штаммов бактерий (Турко, 1995 год). По крайней мере, 30 различных видов бактерий, содержащих более 100 штаммов микробов, могут разлагать НУВ (Артур, 1991 год). Организмы, используемые в формуле биологического удаления загрязнения в «Э-Си-Ти», живут на Земле уже много миллионов лет; они не являются генетически измененными организмами. Эти организмы встречаются в естественных условиях, это обычные бактерии, созданные самой природой. В «Эи-Си-Ти» мы специально создавали наши продукты для использования организмов, встречающихся в естественных условиях, в их природной среде, для облегчения разложения НУВ в почве.

Приемлемость и безопасность

Вообще говоря, НУВ с длиной углеродов от С9 до С22, а также единичные и полицикличные углеводороды лучше всего поддаются разложению. Агентство по охране окружающей среды США заявляет:

Биологическое удаление загрязнений из грунтовых вод может быть эффективным для широкого спектра нефтяных углеводородов (USEPA, 1995 г.).

Для оптимального роста микроорганизмов и удаления загрязнений в форме НУВ с их помощью, этим микроорганизмам требуются особые условия, питательные вещества и акцепторы электронов. Оптимальные условия не существуют на природных месторождениях нефти, или на НПЗ, или в системах, использующих НУВ в качестве топлива. По этим причинам отсутствует угроза разложения нефтепродуктов, несмотря на повсеместное присутствие микробов. Для того, чтобы произошло биологическое разложение, необходимо создать и поддерживать условия для оптимального роста, чтобы условия для роста продолжали оставаться благоприятными.

Организмы, используемые в формулах «Эй-Си-Ти», были специально подготовлены признанным в стране микробиологом, обладающим более чем 20-летним опытом в области применения микробов для биологической очистки загрязнения НУВ. Кроме того, в интересах безопасности и разумной организации продукции, «Эй-Си-Ти» финансировала независимое изучение нашего микробного профиля профессором микробиологии из ведущего университета. Наконец, независимый специалист по промышленной гигиене, обладающий 20-летним опытом, изучает наши формулы на предмет соответствия требованиям охраны труда и рисков для людей.

Механизмы

Каждая партия нефти немного отличается от другой партии. Нефть подобна супу, рецепт которого лишь незначительно отличается от партии к партии, или от момента к моменту, в непрерывных процессах. Поэтому каждый разлив или выброс, или любая полоска земли или воды, загрязненная НУВ, содержит различный химический профиль и создает различные экологические условия. По этой причине нельзя гарантировать, что какой-либо один продукт или процесс удовлетворит все потребности в удалении загрязнения. Однако лабораторные испытания микробного профиля и формул, призванных удовлетворять конкретные потребности конкретного разлива нефти, как правило, стоят от 10 000 до 20 000 долл. США.

«Терра Фирма»

Чистящее средство «Терра Фирма» от компании «Эй-Си-Ти» было разработано для максимально широкого использования – от удаления разливов на земле или на бетоне, до профилактического обслуживания областей с высоким потенциалом разливов – например, защищенных дамбами резервуарных станции.

В случае биологической очистки, как правило, необходим «принудительный старт» для стимулирования организмов ; кроме того, следует уделять определенное внимание поддержанию оптимальной активности. «Принудительным стартом» обычно является система доставки, удовлетворяющая потребности «Треугольника «Эй-Си-Ти», в центре которого находится «Терра Фирма», включающая в себя все необходимые элементы.

Для оптимального разложения нефтепродуктов необходимо выполнить три условия в «Треугольнике «Эй-Си-Ти»:

Надписи на треугольнике:

Electron Acceptor – акцептор электронов

ACT Terra Firma – «Эй-Си-Ти Терра Фирма»

Food - Пища

Nutrients - Питательные вещества

Кислород

Одной из основных причин, по которым микробы не распространяются и не «поедают» нефтяные запасы мира заключается в том, что нефть находится в среде с недостаточным содержанием акцепторов электронов (кислород или нитраты). НУВ являются «пищей» для микробов. Молекулы НУВ в высшей степени редуцированы и, если не найдутся способы для удаления электронной из молекулы и передачи этих электронов другим видам молекулы, готовой принять электрон, нет никакого способа окислить (разложить) НУВ. Даже в случаях с крупными открытыми контейнерами нефти, только поверхность нефти контактирует с кислородом; более глубокие слои не содержат достаточного количества кислорода для того, чтобы дать микробам возможность окислить («съесть») нефтепродукт. Одним из самых легких способов обеспечить наличие акцептора электрона является увеличение количества кислорода в микробном окружении.

Клиент может увеличить время разложения, обеспечивая наличие достаточного количества кислорода (или нитратов) для окисления. Это можно сделать путем обработки почвы после применения, использования обычных сельскохозяйственных азотных удобрений, или путем введения кислорода вместе с «Эй-Си-Ти Терра Фирма» (например, в газированной водной суспензии «Терра Фирма») в несколько скважин, которые были пробурены в земле, на которой необходимо осуществить очистку.

Питательные вещества

В присутствии источника пищи (НУВ) и кислорода, для роста организмам потребуются питательные вещества (такие, как азот и фосфор). Содержание питательных веществ в почвах может быть разнообразным; в результате скорость разложения также может быть разной. Для маломасштабных операций (таких, как небольшие разливы), почвы могут содержать достаточное количество питательных веществ для поддержания роста микробов. Для более крупномасштабных операций дополнительные питательные вещества в форме обычных удобрений могут помочь ускорить процесс разложения.

Как правило, акцепторы электронной и питательные вещества представляют собой два важнейших компонента любой системы поставки (EPA, 1995 год).

Откуда мы знаем?

Откуда мы знаем, какой баланс между питательными веществами и акцепторами электронов является оптимальным? В течение более чем 20 лет общепринятым мнением было, что чрезвычайно трудно оценивать эффективность любой конкретной микробной формулы на любом конкретном участке земли, для любого конкретного разлива углеводородов (Граббз, 1986 год). Трудность возникает в связи с тем, что незначительные изменения состава почв могут привести к значительным изменениям в реакциях любого конкретного организма.

Кроме того, если слой загрязнения НУВ мигрирует через вадозную зону, микробы могут сталкиваться с различными экологическими условиями через каждые несколько метров.

Формула «Эй-Си-Ти Терра Фирма» не основана на использовании одного отдельно взятого организма, но, скорее, мы используем несколько организмов; каждый их них имеет свои собственные биологические потребности и адаптивный потенциал, что позволяет им пользоваться в значительной степени меняющимися условиями. Специально выбранные организмы призваны использовать максимально возможное количество экологических условий.

Применения

«Терра Фирма» может применяться различными способами, в зависимости от характера подлежащего очистке материала. Продукт может применяться непосредственно на почве, на бетонных фундаментах или других поверхностях.

Если загрязнение просочилось на глубину, «Терра Фирма» может применяться на почвах с последующим вспахиванием для улучшения доступа воздуха и контакта с загрязняющим веществом.

Если загрязняющие вещества просочились в более глубокие слои почвы и в воду вадозной зоны, продукт может создавать суспензию (с добавлением или без добавления дополнительных акцепторов электронов) и вводиться непосредственно в вадозную зону через скважину для взятия проб. В случае насыщения материала кислородом во время создания суспензии кислород и питательные вещества будут разлагаться, поскольку организмы потребляют НУВ. Повторное насыщение кислородом и пополнение запасов питательных веществ могут осуществляться на дополнительных скважинах.

Поскольку микро-окружение может меняться в каждом проекте удаления загрязнения (и стоимость определения идеальных условий для каждой площадки может быть чрезвычайно высокой), потребности в насыщении воздухом, потребности в питательных веществах, оценки эффективности могут осуществляться путем взятия проб вадозной воды, а также с использованием стандартных методов Кригинга, с соответствующей корректировкой подземных условий.

Биологическое удаление загрязнения путем биологической интенсификации – это процесс, история которого насчитывает четыре десятилетия. Он предназначен для очистки загрязненных почв и поверхностей безопасным, экологически благоприятным способом.

Пожалуйста, свяжитесь с нами для получения информации относительно специальной формулы, адаптированной для удовлетворения ваших потребностей.

Литература

Брок Т.Д., Мэдигэн М.Т., Мартинко Дж.М., Паркер Дж. «Биология микроорганизмов», седьмое издание. «Прентис Холл Пабликейшнз», 1994 год, IBSN 0-13-042169-3

Бесс В.Х., «Би-Би-Си Лэборатриз, Инк.». «Функциональные группы: краткая рекомендация по микробиологическому анализу почвы и компоста», 1999 год.

Турко Р.Ф. и Садовский М.Дж. 1995 год. «Микрофлора биологического удаления отходов». Х.Д. Скиппер и Р.Ф. Турко (редакторы), «Биологическое удаление отходов, наука и применения». 87-103, Общество изучения почв Америки. Специальная публикация 43.

Артур М.Ф., Цвик Т.С., О’Брайен Г.К. и Марш С.С. 1991 год. «Оценка методов насыщения воздухом для биологического удаления отходов на почвах, загрязненных топливом. Серия: инновационные технология обработки опасных отходов. Том 3: Биологические процессы. Ланкастер, Пенсильвания: 185-196. «Техномик Паблишинг Ко., Инк.»

USEPA, глава Х, «Биологическое удаление отходов в грунтовых водах на местах». OUST: «Каким образом оценивать альтернативные технологии очистки для площадок подземного хранения в резервуарах: руководство для лиц, изучающих план исправительных действий. (EPA 510-B-95-007).

Граббс, Р.В. «Улучшение биологического разложения алифатических и ароматических углеводородов путем биологической интенсификации». Представлено на 4-й ежегодной конференции по управлению опасными материалами в Атлантик-Сити, Нью-Джерси, 1986 год.

Тестирование ЕРА

Программы биологического удаления отходов с использованием штамма микроорганизмов «Эй-Си-Ти»

(пропуск) площадка НПЗ в южной Калифорнии. Площадка площадью 32 акра была расположена в основной промышленной зоне; наша цель заключалась в очистке площадки до достаточно низкого уровня, чтобы можно было строить на ней коммерческие здания.

Первоначальные уровни загрязнения площадки находились в следующем диапазоне: 1500 частиц на миллион (нижний предел) до 30 000 частиц на миллион (верхний предел). Площадка была разделена на несколько зон обработки; началась реализация программы биологической очистки с использованием консорциума микроорганизмов, предоставленного «Эй-Си-Ти». Поскольку площадка периодически загрязнялась в течение 40 лет, без каких-либо признаков устранения загрязнения местными организмами, был сделан вывод о том, что программа биологической интенсификации могла бы ускорить процесс удаления загрязнения.

Обработка проводилась в течение шести месяцев. В момент обработки зоны другие зоны выводились из эксплуатации до тех пор, пока весь резервуарный парк не был демонтирован. Когда зоны выводились из эксплуатации, началась обработка зон для удаления загрязнений с указанных частей имущества. 29 зон территории были сертифицированы в качестве чистых в течение одного года. Остальные зоны, которые использовались в качестве района размещения отходов, все еще находятся очищаются.

Вопрос 2: Город Карсон (штат Калифорния) принял решение использовать полномочия по повторной застройке участков и признал негодной площадку, которая ранее использовалась в качестве места хранения нефтяных резервуаров и для спасательных операций. Площадка была бельмом на глазу. Город принял решение избавиться от загрязняющих веществ, вместо того, чтобы герметизировать загрязняющие вещества на строительной площадке и в месте парковки. Можно выделить площадку для ее использования в качестве парка; но городские чиновники были озабочены тем, что, если бы загрязняющие вещества остались в этом месте, они могли бы поставить под угрозу здоровье использующих парк детей (13).

Стоимость удаления загрязненной почвы для надлежащей утилизации оценивалась в размере 2 млн. долл. США. Ориентировочное количество загрязненной почвы составило приблизительно 10 000 кубических ярдов. Программа биологической интенсификации была предложена и принята на площадке.

Стоимость очистки составила менее 132 000 долл. США; город начал делать предложения в отношении своего самого совершенного рекреационного объекта.

Вопрос 3: Когда муниципальный район Сакраменто приобрел небольшой участок земли для расширения своей существующей парковки, властям не было известно о том, что земля была ранее загрязнена дизельным топливом. Как только загрязнение было обнаружено, Муниципальный район принял решение взять на себя очистку площадки.

Район понял, что простые землеройные работы и транспортировка загрязненной почвы в место свалки отходов означало перенос проблемы на другую площадку. В соответствии с Районной политикой охраны окружающей среды, власти занялись поиском других альтернатив утилизации земли.

После изучения возможностей переработки Район принял решение о внедрении программы биологического удаления загрязнений, с использованием биологической интенсификации в качестве источника организмов. Биологическая очистка 2000 кубических ярдов загрязненной почвы привела к уменьшению Общего содержания нефтяных углеводородов с 2800 частей на миллион до менее чем 38 частей на миллион в течение приблизительно 74 дней очистки (11). Стоимость очистки составила 360 000 долл. США, за вычетом общей стоимости утилизации без внутреннего обязательства.

Вопрос 4: Биологическая очистка была методом очистки, выбранным для обработки 1500 кубических ярдов почвы, загрязненной дизельным топливом, на бывшей остановке «Кингз Трас» в Сакраменто (штат Калифорния). Реализация проекта привела к снижению уровней загрязнения с 3000 частей на миллион до менее чем 30 частей на миллион приблизительно за 62 дня очистки.

Вопрос 5: Биологическая очистка на местах была необходима для удаления загрязнения из разорванной линии перекачки, проходившей под железнодорожным полотном. Огромный вагон-цистерна двигался по железнодорожному полотну в то время, когда по линии перекачки перекачивались растворители. Возникший в результате разрыв привел к потере 300-400 галлонов растворителя на глубине 38 дюймов под поверхностью на отрезке длиной 120 футов железнодорожного полотна.

Для обработки загрязненной почвы была разработана и установлена постоянно рециркулирующая наземная инжекционная система. После реализации девятимесячной программы очистки с системой биологической интенсификации было достигнуто 99,5%-ное расщепление загрязняющих веществ (Таблица 1).

Вопрос 6: В настоящее время реализуется проект биологической очистки 32 000 кубических ярдов почвы, загрязненной различными смазочными веществами и маслами. Предварительные результаты показывают, что уровни загрязнения были снижены с 4800 частей на миллион до 125 частей на миллион на самом загрязненном участке. На менее загрязненных участках уровень загрязнения снизился с 1400 частей на миллион до уровня 100 частей на миллион (уровень, не требующий принятия мер по очистке).

ФАКСОВЫЙ МЕМОРАНДУМ: 20 января 2002 года

КОМУ: г-ну Тодду Франссену (303-833-3613)

ОТ: доктора наук П. Брока Уильямса

Касс.: тестирование выживания бактерий с вашим составом при симулированных условиях

Уважаемый г-н Франссен:

Насколько Вам известно, мы изучали выживаемость бактерий с вашим составом при различных условиях. Мы стерилизовали почву, обеспечили содержание в ней 26% жидкости, добавили нефть и ваш состав при 16 мг/гм грязи. Затем этот состав выдерживался при различных температурах в течение двух дней, и смеси помещались на пластинку и нумеровались.

Наши предварительные результаты не выявили никаких различий в количестве бактерий, полученных в момент выдерживания смеси при комнатной температуре и при 4 градусах Цельсия в течение 2 дней. Когда этот опыт был повторен при температуре минус 20 градусов Цельсия, количество бактерий существенно сократилось, но все-таки оставалось достаточным. Эти эксперименты дублировались и дали аналогичные результаты.

Выживаемость бактерий при более поздних условиях была удивительной. Нашей первой мыслью было, что именно ваш состав обеспечил улучшение выживаемости.

Безусловно, что эти результаты предстоит еще подтвердить с использованием целого ряда различных инструментов контроля и дальнейших экспериментов; однако результаты предварительных экспериментов являются достаточно многообещающими для вашего предполагаемого применения.

С уважением,

(подписано)

Доктор наук П. Брок Уильямс

Исследовательский отчет для г-на Тодда Франссена                 10 февраля 2002 года

Воздействие добавления состава к загрязненной нефтью почве на рост бактерий при различных температурах.

Введение:

Некоторое время назад к нам обратился г-н Франссен с вопросом о том, не могли бы мы изучить воздействие добавления его состава на выживаемость бактерий при различных температурах и условиях. Насколько мы понимаем, целью использования данных бактерий была биологическая очистка разливов нефти и, таким образом, мы хотели провести эксперименты на условиях, максимально приближенных к ожидаемым условиям. Для этого потребовались знания о влажности почвы, о количестве загрязнения сырой нефтью, об ожидаемых средних температурах и информация о том, каким образом применялся бы этот продукт. Указанная информация была предоставлена г-ну Франссену и включена в ниже описанные эксперименты.

Экспериментальные условия и расчеты:

1. Погодные условия

Погодные условия в Фэрбэнкс (Аляска) следующие: от -2 до 24 градусов по Фаренгейту в Марте, от +20 до 40 градусов по Фаренгейту в апреле, от +38 до 59 градусов по Фаренгейту в мае. Для покрытия такого диапазона температур и его расширения в более низком диапазоне, мы установили экспериментальные условия при комнатной температуре 23,2-8 и 70 градусов Цельсия (73,4,35,6-94 градусов по Фаренгейту, соответственно).

2. Содержание жидкости

Содержание жидкости в почве оценивалось на уровне 26%. Таким образом, содержание жидкости в грязи корректировалось до 26%.

3. Применимый состав

Состав, содержащий бактерии, применялся в соотношении 1 фунт на квадратный фут. При вспахивании состав погружался в землю на глубину 12 дюймов. Для округления этого значения мы добавили 16 мг состава на грамм грязи.

4. Содержание нефти в почве

По оценкам, приблизительно 7000 баррелей (55 галлонов на баррель) сырой нефти содержалось на поверхности площадью около 6 акров. Поскольку 1 акр = 43560 квадратным футам, и разлив нефти уходит на один фут в глубину, то 6 х 1 х 43560 кв. футов = 261 360 куб. футов в 6 акрах. Поскольку 7000 баррелей х 55 галлонов / 261360 куб. футов, то получаем 1,47 галлонов на куб. фут. Учитывая, что 1 галлон = 3,785 литров и 1 акр = 4047 кв.м., мы конвертируем вышеуказанное в метрические единицы и находим формирующие единицы. При температуре 20 градусов Цельсия были обнаружены 50-100 КОЕ с материалом, который содержал бактерии, и менее 15 КОЕ с составом, не содержащим бактерии (см. Таблицу 1).

________________________

Данная работа выполнялась в Справочной лаборатории IBT, Ленокса, штат Канзас.

Указанные эксперименты показали, что бактерии с составом были стабильными в течение 72 часов при температуре 2-8 градусов Цельсия. Они также показали, что состав, который содержал дополнительные бактерии, содержал бактерии, которые также были стабильными при температуре 2-8 градусов Цельсия в течение 72 часов. Совершенно разные результаты наблюдались при температуре -20 градусов Цельсия в течение 72 часов. Здесь состав с добавленными бактериями привел к уменьшению числа жизнеспособных бактерий приблизительно на 33-25%. В материале без добавленных бактерий КОЕ сократилось с 300-500 колоний при 2-8 градусах Цельсия до менее чем 15 колоний. Эти результаты показали, что бактерии, наблюдаемые в составе, который не содержал добавленных бактерий, подлежали замораживанию. Одновременно бактерии, которые добавлялись к составу, представлялись гораздо более стабильными к температурам ниже уровня замерзания. Кроме того, состав с добавленными бактериями показал значительную выживаемость при помещении в температуру -20 градусов Цельсия на 72 часа.

Вышеуказанный эксперимент повторялся в точности так же, как и раньше, за исключением добавления контрольного образца без состава. Образцы выдерживались при температуре 2-8 градусов Цельсия, -20 градусов Цельсия и -70 градусов Цельсия в течение 72 часов. Здесь мы отмечаем, что состав с добавленными бактериями имел значительный рост после 72часов выдерживания при температуре 2-8 градусов и -20 градусов Цельсия. В действительности не отмечалось практически никаких различий в росте между двумя условиями выдержки. Количество бактерий было немного больше, чем в предыдущем эксперименте, главным образом, благодаря распространению бактерий до организации эксперимента. Когда выдерживание проводилось при температуре -70 градусов Цельсия, бактерии из любого из составов не выживали. Состав без добавленных бактерий также показал очень низкий рост при всех трех экспериментальных условиях. Контроль без добавленного состава продемонстрировал наличие 3 колоний при температуре 2-8 градусов Цельсия и отсутствие роста при -20 и -70 градусах Цельсия. Это показывает, что наша процедура стерилизации эффективно сократила количество бактерий в почве, и подкрепляет наше предположение о том, что состав без добавленных бактерий содержал бактерии, подверженные замораживанию. Коме того, материал с добавленными бактериями имел очень хорошую выживаемость при -20 градусах Цельсия, однако бактерии уничтожались при температуре -70 градусов Цельсия.

Обсуждение

Данные эксперименты показывают экономящее действие состава при достаточно экстремальных условиях на выживаемость добавленных бактерий. Они также показывают, что добавленные бактерии, скорее всего, будут более стабильными, чем бактерии, входившие состав во время первых экспериментов. Условия эксперимента были гораздо более экстремальными, чем условия, ожидаемые для марта в Фэрбенксе. Таким образом, можно ожидать, что эти бактерии будут хорошо выживать при обычных температурах.

Выводы:

Бактерии, добавленные к составу, были очень стабильными при температуре -20 градусов Цельсия в течение 72 часов. Произошло незначительное уменьшение количества бактерий, но оно было небольшим. Можно считать загрязнение эквивалентным приблизительно 170 мкл/мл или грамм почвы. Таким образом, мы использовали 200 мкл нефти на грамм почвы в качестве фактора загрязнения.

Методы и материалы:

1. Обезвоживание и стерилизация грязи

Грязь и стерилизация грязи

2. Гидратация грязи

К каждому количеству стерилизованной грязи, кратному 100 граммам, было добавлено 26 мл обезвоженного эндотоксина (Biowhittaker). После этого состав тщательно перемешали.

3. Добавление нефти

К каждому количеству грязи добавили 20 мл нефти.

4. Добавление состава

К одному определенному количество было добавлено 1,6 г материала без бактерий; все тщательно перемешивалось. К другому определенному количеству было добавлено 1,6 г материала с бактериями; все тщательно перемешивалось. Затем каждое определенное количество делилось на 9 тюбиков, по ____ грамм на тюбик.

5. Температурные риски

Три тюбика каждого определенного количества хранились при следующих условиях: при -20 градусах Цельсия, 2-8 градусах Цельсия и при комнатной температуре +23 градусов Цельсия в течение 72 часов. Эксперименты повторялись при 2-8 градусах Цельсия, -20 градусах Цельсия, -20 градусах Цельсия и -70 градусах Цельсия.

6. Оценка бактерий

После указанной выдержки 5 мл апирогенной воды добавлялось к каждому определенному количеству, которое затем энергично встряхивалось. Затем 1 мл из каждой выдержки помещался на пластинку с кровяным агаром (Remel). Пластинки выдерживались при температуре +37 градусов Цельсия в течение 18 часов; колонии нумеровались.

Результаты:

Первые эксперименты позволили создать условия для выращивания, частично идентифицировать бактерии (с помощью красителя Грамма) и определить условия их роста, создать условия и проверить стерилизацию грязи. Вышеописанные условия использовались для первых экспериментов. Обнаружилось, что при комнатной температуре существует слишком много бактериальных колоний, чтобы их нумеровать. При температуре 2-8 градусов Цельсия, с содержащим бактерии материалом, мы пронумеровали 200-400 КОЕ. Мы обнаружили приблизительно такое же количество колоний для состава, для которого не предполагалось содержание бактерий (300-500 колоний).

Предполагаем, что, поскольку температуры будут повышаться в течение дня, бактерии будут размножаться и распространяться.

Выдержка при температуре -70 градусов Цельсия в течение 72 часов не уничтожила бактерии.

Эксперимент 1.

Эксперимент II

Отчет подготовлен:

(подписано)

Доктор наук П. Брук Уильямс

ЛИСТ ДАННЫХ О БЕЗОПАСНОСТИ МАТЕРИАЛОВ

«Терра Фирма Клинер»

(для общего распространения)

Лист данных безопасности материалов подготовлен «Эмерикэн Клининг Текнолоджиз Инк.»

Процедуры первой помощи в чрезвычайных ситуациях содержатся в последней записи Раздела 6

Компоненты данного продукта удерживаются в соответствии с положениями 29 CFR пар. 1910.1200(i). Полное раскрытие информации по Листу данных о безопасности материалов предоставляется специалистам по промышленной безопасности, врача и лечащим медсестрам.

OSHA PEL для вдыхаемого кварца в данном продукте составляет 0,67 мг/м3 от всего продукта. PEL для всего кварца в данном продукте составляет 2,0 мг/м3 от всего продукта. Продукт не оценивался на присутствие других соединений кремния – таких, как трепел, тридимит и кристобалит.

В соответствии с наилучшей информацией, имеющейся у «Эмерикэн Клининг Текнолоджиз Инк.» («Эй-Си-Ти Инк»), контроль воздействия до 2,0 мг/м3 от всего продукта будет контролировать воздействие производственных лимитов для кремния.

Воздействие не на человека, как правило, не входит в сферу Листа данных безопасности материалов. Однако для обеспечения максимальной безопасности «Эй-Си-Ти Инк.» оценила потенциальное воздействие микробного компонента данного продукта на сельское хозяйство. К целом, нормальные и здоровые животные не должны испытывать на себе воздействия любого из микробных штаммов нашего продукта. В литературе отсутствуют какие-либо указания на то, что бактериальный компонент причинял бы какой-либо вред животным или растениям при использовании «Терра Фирма Клинер». Все штаммы являются бактериями, широко распространенными в окружающей среде; некоторые штаммы входят в обычную флору животных.

Средства пожаротушения и специальная процедура пожаротушения: В случае пожара устраните преобладающее топливо. Добавление кислот к данному продукту приведет к образованию углекислого газа и тепла. Если кислоты контактируют с продуктом в закрытом контейнере, это может привести к сильному давлению.

Общее обсуждение по пожарам и взрывам. Данный продукт не является воспламеняющимся. Вещество разлагается при высоких температурах, образуя двуокись углерода и окись углерода. При высоких температурах может возникнуть пиролиз растительных субстанций.

Стабильность: Спонтанная полимеризация или реакции не будут происходить.

Опасные продукты распада: Добавление воды приведет к образованию тепла; в закрытых контейнерах может произойти повышение давления. Минеральные кислоты (соляная кислота и т.п.) приведут к выделению большого количества пузырьков газа и к обильному образованию углекислого газа.

Несовместимость: Присутствие кислот приведет к образованию некоторого количества двуокиси углерода.

Обработка: данный материал может вызывать раздражение незащищенной кожи, глаз и слизистых мембран.

Хранение: Хранить в герметичном контейнере, в сухом месте.

Общее обсуждение: Основные озабоченности в отношении неблагоприятного воздействия продукта на здоровье связаны с несущественным содержанием кремния. Использующие наш продукт курильщики будут подвергаться более высокому риску возникновения проблем со здоровьем.

Примечания для специалиста по промышленной гигиене и врача: «Эй-Си-Ти, Инк» настоятельно рекомендует консервативный контроль контакта с продуктом у людей, страдающих туберкулезом, силикотическими заболеваниями и другими интерстициальными легочными заболеваниями или фиброзом.

Острое воздействие на здоровье: Пыль от продукта будет раздражать глаза, кожу и слизистые мембраны. Глотание пыли может немедленно привести к образованию углекислого газа в желудке. У людей, чувствительных к хлопкообразной пыли, может возникнуть анафилактическая (аллергическая) реакция.

Хроническое влияние на здоровье: Силикоз и силикозообразные изменения в легких могут возникать при хроническом (долговременном) вдыхании (с сопутствующим ростом предрасположенности к туберкулезу). Может возникнуть контактный дерматит.

Риск онкологических заболеваний: различные соединения кремния имеют разный канцерогенный рейтинг. Этот продукт считается канцерогенным в связи с содержанием кремния. В нижеприведенной таблице мы представили канцерогенные рейтинги для большинства канцерогенных соединений кремния.

Репродуктивное здоровье: риски отсутствуют.

ПРОЦЕДУРЫ ПЕРВОЙ ПОМОЩИ В ЧРЕЗВЫЧАЙНЫХ СИТУАЦИЯХ

Риск при вдыхании: Вывести человека на свежий воздух; избегать концентраций свыше 0,67 мг/м3 вдыхаемого продукта. Примечание для врача: дыхательная недостаточность может быть вызвана анафилактической реакцией на растительную клетчатку, аналогично биссинозу, и(или) (в меньшей степени) контактом с субтилизином.

Контакт с глазами: Незначительная травма глаз может возникнуть в случае попадания порошка в глаза. При этом немедленно промойте глаза большим количеством изотонического средства для промыва глаз. При отсутствии промывки для глаз промойте глаза прохладной водой. Обратитесь к врачу.

Контакт с кожей: Вымойте кожу, на которую попал порошок, теплой водой с мылом.

Пероральный прием вовнутрь: После приема вовнутрь возникнет быстрое выделение газа, с образованием умеренных количеств углекислого газа.

Рассыпание и чрезвычайные ситуации: Подметите сухой материал и выбросите в качестве безопасного материала. Если рассыпаны большие количества (более 10 фунтов), «Эй-Си-Ти, Инк.» рекомендует собрать порошок и выбросить его на полигоне для промышленных отходов.

Утилизация отходов: Если данный материал утилизируется в форме сырья, продукт, вероятно, не будет отвечать определению опасных отходов (RCRA). Однако если рассыпано большое количество порошка (больше 10 фунтов), «Эй-Си-Ти, Инк.» рекомендует собрать его и утилизировать на полигоне для промышленных отходов.

Вентиляция: Стандартная практика вентиляции для обеспечения промышленной гигиены должна использоваться для контроля контакта человека с этим продуктом.

Средства индивидуальной защиты:

Одежда: Стандартная рабочая одежда обеспечивает достаточную защиту. Одежду нужно снимать в конце рабочей смены и хранить в месте работы.

Перчатки: Стандартные нитрильные или латексные перчатки обеспечат достаточную защиту.

Защита для глаз: Стандартные очки безопасности, с боковыми щитками, обеспечат достаточную защиту.

Защита дыхательной системы: Средства контроля на рабочее месте и добросовестные методы работы лучше, чем средства индивидуальной защиты, включая использование респираторов. Данные рекомендации являются только индикативными и не могут применяться к каждой ситуации. Достаточная защита будет обеспечиваться с помощью эквивалента защиты дыхательной системы – фильтра N100 или более старого фильтра HEPA (APR с (фиолетовым) картриджем DFM). По мнению «Эй-Си-Ти», пылевые маски не будут обеспечивать достаточной защиты.

Санобработка людей: Все пользователи нашего продукта должны проходить надлежащую санобработку.

Нормативные акты по охране окружающей среды: Закон о консервации и восстановлении ресурсов (RCRA): Если наш продукт был забракован, материал, вероятно, не будет являться опасным отходом, как определено в RCRA. Однако конечный пользователь обязан определить соответствие RCRA и провести тестирование, как показано в 40 CFR, параграф 261.21 – 261.24. В следующей таблице указывается ожидаемый листинг нашего продукта по RCRA.

Закон о контроле загрязнения воды: Не определено. Данный материал не должен размещаться в муниципальные службы или природные воды.

Право сообщества на информацию (SARA III)

Закон о контроле токсичных веществ: Полагают, что все компоненты продукта входят в инвентарный список TSCA.

Государственные нормативные акты: Данный Лист данных о безопасности материалов был подготовлен в соответствии с положениями «Стандарта сообщения об опасностях» Закона о технике безопасности и охране труда, подготовленного Федеральным министерством труда. Несколько штатов (главным образом, Калифорния, Пенсильвания, Нью-Джерси и Мэриленд) независимо опубликовал положения, касающиеся Листа данных о безопасности материалов. «Эй-Си-Ти, Инк.» специально не определяла, соответствует ли данный Лист данных о безопасности материалов положениям любого конкретного штата. Предоставленная ниже информация носит общий, не исчерпывающий характер. Возможно, что продукт содержит другие соединения, включенные в списки различных штатов.

Предложение штата Калифорния 65: Кремний включен в «Список химических веществ, известных в штате в качестве вызывающих рак или токсичных для репродуктивной системы» в штате Калифорния. Полагаем, что информация, содержащаяся в данном Листе данных о безопасности материалов, является достаточной, согласно Предложению 65, для работодателя, чтобы проинформировать сотрудника об рисках для репродуктивной системы и риске онкологических заболеваний.

Штат Массачусетс, Нью-Джерси и Калифорния

Данный Лист безопасности данных был подготовлен специально для соблюдения указанных нормативных актов штата, может содержать или не содержать соединения, присутствующие в таком количестве, что необходимо составлять по ним отчеты в соответствии с требованиями штата.

ОТКАЗ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ

Информация, содержащаяся в данном Листе данных о безопасности материалов касается конкретно материала и может быть недействительной при использовании в сочетании с другими материалами или в любом непредусмотренном процессе. Информация по нашему продукту является точной, насколько нам известно, но не призвана быть исчерпывающей и должна использоваться только в качестве общего руководства. Пользователь обязан обеспечить, чтобы продукт был подходящим для конкретного использования. Пользователь принимает на себя всю ответственность за соблюдение действующих Федеральных и местных нормативных актов, а также нормативных актов штата. Мы не принимаем на себя ответственность за убыток или ущерб, могущий возникать в результате использования данной информации.